技術文章
Technical articles產(chǎn)品簡介:
原卟啉(Protoporphyrin IX)分子量為 562.66,CAS 號為 553-12-8,在生物體內(nèi)原卟啉的含量可間接反應鐵的缺乏與否。原卟啉(FEP)檢測試劑盒(熒光比色法)是利用酸化液破壞紅細胞并提取原卟啉(FEP),后者在紫外線照射下會發(fā)出熒光,可通過熒光分光光度計等測定 FEP 含量,該試劑盒主要用于檢測人、動物血液的紅細胞內(nèi)游離原卟啉(FEP)的測定,反映缺鐵性貧血的程度,但應事先或者事后檢測相應的紅細胞比容。該試劑盒僅用于科研領域,不宜用于臨床診斷或其他用途。
產(chǎn)品組成:
試劑(A): 肝素鈉溶液(125U/ml) 0.5ml -20℃
試劑(B): 原卟啉Ⅸ標準(5mg/L) 1ml -20℃ 避光
試劑(C): FEP 酸化液 2×100ml RT
使用說明書 1 份
自備材料:
1、 生理鹽水
2、漩渦振蕩器、離心機
3、熒光分光光度計
操作步驟(僅供參考):
1、配制肝素抗凝全血:按新鮮全血:肝素鈉溶液(125U/ml)=9:1 配制。
2、配制原卟啉Ⅸ標準工作液(50μg/L): 室溫溶解原卟啉Ⅸ標準(5mg/L),取 10μl 加至990μl 的 FEP 酸化液,混勻,即為原卟啉Ⅸ標準工作液(50μg/L),4℃可保存 1 周。
3、按下表進行操作,并以生理鹽水作為空白對照
空白管 標準管 待測管
肝素抗凝全血 — — 0.05
原卟啉Ⅸ標準工作液(50μg/L) — 0.05 —
生理鹽水 0.05 — —
FEP 酸化液(ml) 3.5 3.5 3.5
4、置于漩渦振蕩器上振蕩 2~3min,3000 r/min 離心 6min,取上清。
5、熒光分光度計進行熒光度測定(激發(fā)濾片 400nm,發(fā)射濾片 600nm),以空白管作為調零點,標準管校熒光強度并調至 100,讀取待測管的熒光強度讀數(shù)(Fu )。
6、另用該肝素抗凝全血測紅細胞比容(PCV ),紅細胞比容常采用臨床檢驗科的血細胞自動分析儀進行測定。
結果計算:FEP(μg/L,RBC)=35×(Fu/PCV )
參考區(qū)間: 正常人: (398.4±131.7)ug/L RBC
注意事項:
1、 整個操作均應在避光條件下進行,并盡快完成。
2、 原卟啉在強光下易分解,收集好的血液樣本應立即 4℃避光保存,24h 以內(nèi)用完。
3、 熒光強度會隨著時間的延長而逐漸衰退,但 2h 以內(nèi)基本穩(wěn)定。
4、 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
有效期:6 個月有效。